Abstract FR:

Dans les cellules eucaryotes, les arn-polymerase i, ii et iii produisent respectivement, principalement les arnr, les arnm et les arnt. Nous avons etudie l'organisation de l'arn-polymerase ii humaine, en analysant les interactions entre chaque paire des 12 sous-unites par la technique du gst-pulldown. Ceci nous a permis de proposer un schema d'interactions potentielles dans l'enzyme. Ce schema a ete confronte aux resultats d'autres equipes et a la structure de l'arn-polymerase ii de levure, recemment resolue. La plupart des interactions observees existent dans la structure, mais un certain nombre d'interactions supplementaires sont revelees. L'une des sous-unites, hrpb9, n'interagit avec aucune autre sous-unite dans cette etude. Nous avons tente de comprendre comment elle pourrait etre recrutee au sein de l'enzyme. Nous avons ensuite etendu cette etude d'interaction a plusieurs facteurs generaux de transcription et d'autres facteurs cellulaires. Ces resultats sont confrontes aux donnees structurales disponibles. Nous avons tente de mettre au point la reconstitution d'une arn-polymerase ii humaine recombinante a partir des sous-unites surproduites dans les cellules d'insecte sf9. Nous pouvons immunoprecipiter les douze sous-unites de maniere stoechiometrique, cependant nous n'avons pas obtenu de complexe stable possedant une activite enzymatique dans ce systeme. Nous nous sommes concentres sur l'etude des fonctions de deux sous-unites particulieres. L'une d'entre elle, hrpb6, est une sous-unite tres conservee, partagee par les trois arn-polymerases. Nous avons observe qu'elle serait plus particulierement importante dans l'arn-polymerase ii. L'autre, hrpb11, a la particularite d'appartenir a une famille de genes chez l'homme,