thesis

Thérapie génique appliquée à la protoporphyrie érythropoïétique humaine : Correction d'un épissage alternatif anormal par l'utilisation d'oligonucléotides en antisens

Defense date:

Jan. 1, 2012

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Disciplines:

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Abstract EN:

Deleterious accumulation of protoporphyrin IX (PPIX) in erythroid cells can result from a partial deficiency in ferrochelatase (FECH) or from induction of ALAS2. Most protoporphyric patients (EPP) present in trans to a FECH gene mutation an IVS3-48C hypomorphic allele promoting a abnormal alternative splicing. The aberrantly spliced mRNA is degraded and contributes to a low FECH enzyme activity allowing EPP phenotypic expression. We have identified an antisense oligonucleotide (V1-ASO) which allows redirecting splicing from the cryptic to the physiological site. This V1-ASOmediated redirection allows reducing by 60% the PPIX overproduction in primary cultures of EPP erythroid progenitors. .

Abstract FR:

L'accumulation pathologique de protoporphyrines IX (PPIX) dans les cellules érythroïdes peut être due à un déficit partiel d'activité de la ferrochélatase (FECH) ou d'une suractivité de l'ALAS2. 96% des patients protoporphyriques (PPE) présentent en trans d'une mutation du gène FECH un allèle hypormorphe IVS3 -48C favorisant un épissage alternatif anormal. L'ARNm anormal est dégradé et contribue à la diminution de l'activité FECH responsable de l'expression phénotypique. Nous avons identifié un oligonucléotide en antisens (V1-ASO) capable de rediriger l'épissage du site cryptique anormal vers le site physiologique. Cette redirection par V1-ASO permet de réduire de 60 % l'accumulation de PPIX dans des cultures de progéniteurs erythroïdes PPE.