Abstract FR:

Nous avons cloné et séquencé des adnc et certains gènes codant pour l'ensemble des sous-unités du facteur d'élongation ef-1. Après le séquençage de l'adnc codant pour tcef-1, nous avons rapporté pour la première fois que cette sous-unité possède des homologies de séquence avec les gsts. Il est donc vraisemblable que cette protéine puisse jouer un rôle dans d'autres processus biologiques. Afin de répondre à cette question, nous avons conduit des expériences de transfection avec une construction plasmidique permettant la surexpression de tcef-1. Cette surexpression induit l'apparition de mutants dont le phénotype se caractérise par une résistance accrue à la clomipramine. Ces résultats suggèrent que tcef-1, par son domaine de type gst, pourrait participer au phénomène de détoxication des xénobiotiques. Dans un deuxième temps, nous avons cloné et séquence le gène codant pour tcef-1, exprime la protéine dans le système bactérien et produit des anticorps et nous avons étudié sa localisation chez la forme épimastigote au cours de la croissance in vitro. Nous avons rapporté que la mort des formes parasitaires en phase stationnaire présente l'ensemble des caractéristiques morphologiques et biochimiques de l'apoptose observée chez les organismes multicellulaires. Le résultat surprenant est que la distribution de la sous-unité est cytoplasmique en phase logarithmique et préférentiellement nucléaire chez les formes en sénescence ou en apoptose présentes dans la phase stationnaire. Afin de confirmer la localisation nucléaire, nous avons traité les parasites avec la généticine que l'on savait induire 100% d'apoptose dans les formes épimastigotes. Dans ces conditions, 100% des formes parasitaires traitées par la drogue montrent une localisation nucléaire de tcef-1. Ainsi, outre la fonction d'élongation de la synthèse protéique ef-1 pourrait jouer un rôle dans la transcription en relation avec le processus de vieillissement ou de mort par apoptose