Abstract FR:

Le récepteur de l'hormone folliculo-stimulante (RFSH), exprimé chez le mâle par les cellules de Sertoli, est un récepteur couplé aux protéines G (GPCR). En présence de son agoniste, il perd rapidement sa capacité à activer son effecteur principal, l'adénylate cyclase. Les travaux menés sur des lignées cellulaires transfectées par le RFSH, ont montré que cette désensibilisation requiert la phosphorylation du récepteur occupé par son agoniste par les kinases spécifiques des GPCRs, les GRKs. Cette phosphorylation provoque la liaison des bêta-arrestines (β-arr) au RFSH, son découplage avec la protéine G alphas et l'internalisation clathrine-dépendante du complexe récepteur-ligand. Nous avons mis en évidence que le RFSH interagit de façon agoniste-dépendante avec des GRKs déficientes pour leur activité kinase impliquant que le découplage du RFSH pourrait résulter d'un encombrement stérique plutôt que d'une phosphorylation. Nous avons établi que la surexpression de chacune des GRKs 2, 3, 5 et 6 et β-arr1 et 2 découple la réponse FSH en terme de production d'AMPc dans des cellules de Sertoli en culture primaire. De plus, la GRK2 et la β-arr1 endogènes sont recrutées sous stimulation vers les membranes, confirmant l'implication des GRKs et β-arr endogènes dans la modulation de la réponse FSH dans les cellules de Sertoli. Afin de préciser la cinétique des événements nous avons suivi le trafic intracellulaire in situ du RFSH, des GRKs et β-arr. Le RFSH surexprimé en cellules Cos7 est membranaire et la GRK2 et la β-arr1 sont cytosoliques. Après 4 min. De stimulation FSH, le récepteur colocalise avec la GRK2 et la β-arr1. Après 30 à 60 min. De stimulation le RFSH, la GRK2 et la β-arr1 sont concentrés dans un compartiment péri-nucléaire, avant que le RFSH ne recycle vers la membrane selon un cycle long, alors que la GRK2 et la β-arr1 retrouvent une distribution cytosolique. Aucune colocalisation du RFSH avec la β-arr2 n'a été observée dans la cinétique de stimulation étudiée.