Recherche de nitriles hydratases bactériennes pour la bioconversion industrielle de l'acrylonitrile en acrylamide.
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Abstract EN:
Nitrile hydratase is used as catalyst for the bioconversion of acrylonitrile in acrylamide. A PCR protocol was developed for the specific detection of nitrile hydratase encoding genes. This molecular screening on different soil samples put in evidence nitriles hydratases encoding genes and has permit to obtain complete nitriles hydratase genes sequences. From one of these samples, six bacterial strains were isolated for theirs nitriles hydratases activities. Nitrile hydratase from bacterial strain Rhodococcus pyridinovorans MW3 has an industrial interest: a specific activity of 340 U/mg of dry weight, a production induces by urea and she tolerates 50% of acrylamide in her reactional medium. Furthermore a Rhodococcus / E. Coli shuttle vector has been also developed for the industrial production of a recombinant catalyst and to study the regulation of nitriles hydratases genes expression.
Abstract FR:
La nitrile hydratase est utilisée comme catalyseur pour la bioconversion de l'acrylonitrile en acrylamide. Un protocole de détection spécifique des gènes codant pour cette enzyme par réaction de PCR a été développé. Ce criblage moléculaire sur différents échantillons de sols a révélé la présence des gènes codant pour cette enzyme et a permis également d'obtenir des gènes nitriles hydratases complets. A partir d'un de ces échantillons, six souches bactériennes ont été isolées pour leurs activités nitriles hydratases. La nitrile hydratase de la souche Rhodococcus pyridinovorans MW3 présente un intérêt industriel : une activité spécifique de 340 U/mg de matière sèche, une production induite par l'urée et elle tolère 50 % d'acrylamide dans le milieu réactionnel. Un vecteur navette Rhodococcus / E. Coli a également été développé pour la production industrielle d'un catalyseur recombinant et pour l'étude de la régulation de l'expression des gènes nitriles hydratases.