Multiples rôles des protéines du checkpoint du fuseau dans la régulation de la mitose chez Drosophila melanogaster
Institution:
Paris 7Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
To ensure proper mitosis, a cell must overcome two obstacles: provide a complete set of chromosome to each daughter cell and prevent cell division before proper segregation of genetic material. The spindle checkpoint mechanism coordinates these events by delaying anaphase onset until ail chromosomes are bipolarly attached to spindle microtubules. In the current model, Mad2 and BubR1 are effector proteins of this System which inhibits Cdc20, a coactivator of the ubiquitine ligase APC/C in charge of the degradation of Cycline B and Securin. Mad1 is considered the receptor for Mad2 recruitment in particular at kinetochores where they form a complex. By live cell microscopy of drosophila larval neuroblasts, I observed a similar dynamic/behavior of Mad1 and Mad2 during mitosis. To determine if Mad1 and Mad2 have different functions despite this close association, I compared the mutant phenotypes for madl and mad2 genes. Beyond a defect in the spindle checkpoint, mutant mad2 presented an acceleration of mitotic timing. I also contributed to characterize this role for BubR1 On the other hand, mad1 mutant cells presented lagging anaphase chromosomes of which some were caused by uncorrected merotelic attachments. This suggests a role of Mad1 in kinetochore-microtubule linkages. This work contributed to show that beyond a shared spindle checkpoint function, Mad1 and Mad2 both have a distinct additional function in mitosis.
Abstract FR:
Pour assurer le bon déroulement de la mitose, la cellule doit surmonter deux obstacles : garantir que chaque cellule-fille reçoive un lot complet de chromosome et que la cellule ne se divise pas avant la ségrégation correcte de ce matériel génétique. Ceci est coordonné par le mécanisme du checkpoint du fuseau qui retarde le déclenchement de l'anaphase tant que tous les chromosomes ne sont pas attachés de manière bipolaire aux microtubules du fuseau. Dans le modèle actuel, Mad2 et BubR1 sont les protéines effectrices de ce système qui inhibe Cdc20, le coactivateur de l'ubiquitine ligase APC/C responsable de la dégradation de la Cycline B et de la Sécurine. Mad1 est considérée comme le « récepteur » pour le recrutement de Mad2 en particulier aux kinétochores en mitose où ils forment un complexe. Par vidéo-microscopie des neuroblastes larvaires de drosophile, j'ai observé que Mad1 et Mad2 avaient des dynamiques similaires au cours de la mitose. Pour déterminer si malgré cette association étroite, Mad1 et Mad2 ont des fonctions différentes, j'ai comparé le phénotype de mutants pour les gènes madl et mad2. En plus d'un défaut du checkpoint du fuseau, le mutant mad2 a présenté une réduction de la durée de la mitose. J'ai également contribué à caractériser ce rôle pour BubRl. En revanche, les cellules mutantes pour madl ont présenté des chromosomes en retard à l'anaphase dont certains sont dus à des attachements mérotéliques non corrigés. Ceci atteste d'un rôle de Madl dans les attachements kinétochore-microtubule. Ce travail a contribué à montrer qu'en plus d'un rôle commun dans le checkpoint du fuseau, Madl et Mad2 ont chacune une fonction additionnelle distincte en mitose.