Abstract FR:

L'objectif de ce travail était de développer un test de diagnostic des mammites s. Aureus permettant la détection dans le lait, d'anticorps dirigés contre des antigènes de s. Aureus. Avec des laits infectes par s. Aureus, par un pathogène autre que s. Aureus et non infectés, nous avons évalué les toxines et comme antigènes de diagnostic. Les valeurs de sensibilité obtenues avec ces toxines ont été respectivement de 95 et 99%. Les faibles valeurs de spécificité (19 et 15%) sont probablement dues à la présence d'anticorps naturels. Nous avons alors recherché des antigènes plus à même de signer l'infection. En cultivant la bactérie dans différents milieux et conditions, nous avons mis en évidence, par immunoempreinte, quatre protéines potentiellement candidates pour le diagnostic. Ces protéines ont été caracterisées et purifiées. L'une d'elles, de mm de 29 kda, excrétée en milieu rpmi 1640, s'est avérée, après microséquençage n-terminal, être homologue à la toxine exfoliative b de s. Aureus. Deux protéines, de mm de 32 kda et inférieure à 14 kda, ont été extraites des corps bactériens quel que soit le milieu de culture (bhi, columbia, mod 110, rpmi 1640 et lait). La protéine de mm inférieure à 14 kda présente des homologies avec une protéine de 60 kda de s. Aureus, fixant la vitronectine. La protéine de 32 kda n'a pu être caractérisée en raison des faibles quantités de protéines obtenues. Enfin, une protéine de 23 kda a été obtenue après co-incubation des bactéries avec des polymorphonucléaires neutrophiles bovins (pmns). Cette protéine est homologue à la calgranuline b, une protéine élaborée par les pmns. Elle ne présente donc aucun intérêt pour le diagnostic des mammites a s. Aureus. Un mélange de protéines basiques, obtenu a partir du surnageant de culture de s. Aureus cultive en rpmi 1640, après chromatographie d'échange d'ions, a également été évalué comme antigène de diagnostic. L'utilisation en ELISA de ces différentes préparations antigéniques a mis en évidence que la protéine de mm inférieure à 14 kda et le mélange de protéines basiques permettent d'obtenir les meilleures sensibilités (86 et 84%) et spécificités (79 et 68%). Ces deux préparations antigéniques devront être évaluées dans les conditions du terrain afin de confirmer leur intérêt pour le diagnostic des infections mammaires a s. Aureus bovines, caprines et ovines.