Abstract FR:

Les microRNA sont de petites molécules d’ARN non-codantes de 22nt qui s’apparient avec des ARN messagers cibles et induisent leur dégradation, ou inhibent leur traduction. Ils jouent un rôle essentiel dans le contrôle du développement et de la différenciation cellulaire, et leur dérégulation induit des défauts de développement et des maladies génétiques. La compréhension des mécanismes de biogenèse et d’action des miRNA constitue donc une étape essentielle vers la compréhension et le traitement de ces désordres. J’ai construit un système indicateur « automiR » qui permet de suivre l’activité de miRNA artificiels dirigés contre la protéine fluorescente GFP. Dans ce système, les miRNA artificiels s’associent à la protéine Argonaute-2 pour réprimer l’expression de la GFP par clivage de l’ARN messager, et non à la protéine Argonaute-1 partenaire d’une majorité de miRNA chez la drosophile. Cette particularité constitue l’atout principal du système automiR. Il est maintenant établi qu’une fraction des miRNA agit via AGO2, mais cette voie de répression des gènes reste mal caractérisée. J’ai établi une lignée cellulaire exprimant le système automiR et je l’ai utilisée pour cribler des mutations et des produits chimiques inhibant les miRNA. Le crible génétique m’a permis identifier 20 gènes dont le rôle dans la répression par les miRNA n’avait pas encore été décrit. Leur caractérisation a révélé qu’ils sont requis, en aval de la biogenèse des miRNA, pour leur activité répressive. Le crible chimique m’a permis d’indentifier 64 composés inhibant l’activité des miRNA représentant de nouvelles thérapeutiques potentielles pour lutter contre les désordres liés à la surexpression de miRNA