thesis

Découverte du gène AROM, "Antisense RNA Overlapping MCH gene" : caractérisation d'une nouvelle famille de protéines liant les acides nucléiques

Defense date:

Jan. 1, 2000

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Institution:

Nice

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Chez les mammifères, le gène de la MCH pour " melanin concentrating hormone", code pour deux peptides le NEI et la MCH. Ce gène est impliqué dans de nombreuses fonctions comme la réponse au stress et le contrôle de la prise alimentaire. Nous avons mis en évidence dans des cellules PC12 non stimulées l'expression d'ARN de hauts poids moléculaires contenant les séquences du gène MCH. En combinant les techniques de Northern blot, RACE PCR et RT-PCR, nous avons établi que ces ARN sont transcrits à partir des séquences du brin d'ADN complémentaire au gène de la MCH. Ce gène appelé AROM pour " antisense RNA overlapping MCH gene " est conservé chez le rat, la souris et l'homme. Dans les cellules PC12 traitées au lithium et au NGF, l'expression du gène MCH est régulée par des mécanismes post-transcriptionnels. Les ARN antisens AROM pourraient interagir avec les ARNm MCH, les hybrides ainsi formés modifieraient leur maturation ou leur dégradation. En effet, de nombreux exemples d'ARN antisens sont décrits comme régulateurs de l'expression de gènes "sens". Plusieurs phases ouvertes de lecture ont été identifiées à partir des ARNm AROM. Elles sont la conséquence d'épissages alternatifs et du choix de sites d'initiation de transcription. La protéine la plus longue a été appelée AROM-p64. Les séquences des phases ouvertes de lecture AROM présentent des homologies avec les motifs RRM/leucine-zipper et un domaine d'une hélicase de procaryotes. Grâce à des anticorps dirigés contre les extrémités de la protéine p64, nous avons identifié ces protéines AROM dans les cellules PC12 et les testicules de rat. (. . . )