Abstract FR:

Le but de cette these est la comprehension des evenements cellulaires et moleculaires associes a la fecondation conduisant a la formation de l'embryon chez les plantes a fleurs. Un modele de fecondation in vitro (fiv) qui permet de realiser la fusion entre un gamete femelle, l'oosphere, et un gamete male a ete developpe au laboratoire chez le mais (zea mays l. ). La chronologie des evenements postfusionnels a ete analysee en combinant des observations en video-microscopie, microscopie a fluorescence et microscopie electronique a transmission. Les resultats indiquent que la fusion est suivie par la migration rapide du noyau male vers le noyau femelle au terme de laquelle la caryogamie a lieu, environ 1 heure apres la fusion. L'utilisation d'un agent depolymerisant des microtubules, l'oryzaline, indique que ces constituants du cytosquelette pourraient etre impliques dans la migration du noyau male. Par ailleurs nous avons mis en evidence, en utilisant une sonde calcique fluorescente (fluo 3), que la fusion gametique induit une elevation de la concentration de calcium intracellulaire dans l'oosphere fecondee. Cette variation calcique est transitoire et unique. Enfin, nous avons recherche la presence de transcrits codant pour des proteines kinases regulees par le calcium (cdpk). Une strategie de rt-pcr sur oospheres et zygotes isoles nous a permis d'isoler 3 clones. L'analyse des sequences a permis d'identifier 2 clones de type cdpk (cdpk-z1 et z2) et un clone de type crk (pour calcium related kinase) nomme crk-z. En conclusion, ces travaux montrent que des evenements precoces comparables a ceux observes chez d'autres eucaryotes sont associes a la fusion gametique chez le mais. Ces resultats ouvrent egalement des perspectives nouvelles sur l'analyse des mecanismes d'activation initiant le developpement zygotique chez les plantes a fleurs.