thesis

Microscopie à force atomique de protéines membranaires : application à l'étude de membranes photosynthétiques et à la membrane externe de la mitochondrie : développement de l'AFM à deux chambres

Defense date:

Jan. 1, 2007

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

La microscopie à force atomique (AFM) a été utilisée pour étudier différents systèmes biologiques. Une nouvelle application de l'AFM a été mise au point pour étudier des membranes non supportées. L'AFM a permis l'étude du système photosynthétique bactérien. Ainsi j'ai étudié l'insertion des capteurs de lumière de type 2 dans des bicouches lipidiques de différentes compositions (Gonçalves et al. , 2005b). Mon attention s'est ensuite portée sur les membranes natives, champ dans lequel l'équipe a une quasi-exclusivité des compétences au niveau mondial. Ainsi le système photosynthétique a pu être étudié sur deux souches bactériennes: Phaeospirillum molischianum (Gonçalves et al. , 2005a) et Rhodopseudomonas palustris (Scheuring et al. , 2006), approfondissant nos connaissances sur ce système, ubiquitaire sur Terre, et ces bactéries, qui ont un intérêt croissant pour les milieux industriels. Portant l'étude de membranes natives plus loin, j'ai étudié les membranes externes de mitochondries et ainsi, j'ai pu étudier in situ le canal ionique voltage dОpendant et son assemblage supramoléculaire (Gonçalves et al. , 2007). Dans un souci de développement technologique, un nouveau système a été développé. Celui-ci a en effet permis d'étudier des membranes non supportées, séparant deux compartiments aqueux, dont la composition est modulable. Ce système permettra donc de coupler les études fonctionnelles de protéines activables par des gradients entre les compartiments, aux études structurales permises par l'AFM à haute résolution. Nous avons démontré la faisabilité de telles expériences en appliquant notre système à l'étude des couches S de Corynebacterium glutamicum ainsi qu'à la bactériorhodopsine (Gonçalves et al. , 2006).