Abstract FR:

Des formes cliniques graves d'epidermolyse bulleuse jonctionnelle (ebj), une genodermatose caracterisee par des decollements de l'epiderme a la jonction dermo-epidermique, sont dues a des mutations genetiques de la laminine-5 ; d'autres formes d'ebj ont ete associees a des mutations dans les composants de l'hemidesmosome (bp180, l'integrine 64 et la plectine). Le but de mon travail a ete tout d'abord d'identifier le defaut genetique chez deux patients atteints d'une forme ebj associee a un defaut d'expression de l'integrine 64. Dans un deuxieme temps, j'ai mis au point un modele d'etude de l'adhesion keratinocytaire et de therapie genique par l'utilisation de keratinocytes immortalises issus d'un patient ebj deficient dans l'expression de la chaine 2. La reexpression dans ces cellules d'une chaine 2 recombinante, par transfert d'un adnc codant pour cette proteine, a permis de restaurer la capacite d'adhesion des keratinocytes ebj. Par l'emploi d'adnc mutants, j'ai notamment demontre que le bras court de la chaine 2 est implique dans la polarisation et la stabilisation de la laminine-5 a la matrice extracellulaire. Nous avons donc transduit des keratinocytes ebj secondaires, deficients dans l'expression de la chaine 3 de la laminine-5, avec un transgene codant pour ce polypeptide. Nous avons ainsi demontre que les keratinocytes modifies restructurent des hds dans des epidermes artificiels. Par une approche analogue, nous avons montre que les defauts genetiques bloquant la synthese des constituants de l'hd peuvent etre complementes par transfert d'adnc dans des keratinocytes ebj presentant une alteration de l'integrine 64 et de bp180. L'ensemble de ce travail a abouti a la validation d'un modele d'etude structure/fonction de la laminine-5 et des composants des hds (l'integrine 4, bp180 et la plectine/hd1) d'un modele de therapie genique dans certaines formes d'ebj non letales.