thesis

Amélioration génétique du champignon filamenteux cellulolytique Trichoderma Reesei : développement d'un système de transfert de gènes, expression de gènes hétérologues codant pour l'invertase

Defense date:

Jan. 1, 1991

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Institution:

Bordeaux 2

Disciplines:

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Abstract FR:

Un systeme de transfert de genes a ete developpe pour le champignon filamenteux cellulolytique trichoderma reesei. Deux marqueurs dominants de selection, conferant respectivement la resistance au benomyl et a la phleomycine, ont d'abord ete utilises. Un autre type de systeme de transformation, base sur la complementation de mutations d'auxotrophie, a ensuite ete developpe. Pour cela, des souches de t. Reesei exigeantes pour l'uridine ont ete isolees et ces mutations ont ete complementees avec des genes sauvages heterologues et avec les alleles sauvages de t. Reesei. Ce systeme de transformation est revele suffisamment efficace (jusqu'a 10#5 transformes/microgramme de vecteur) pour permettre le clonage du gene suc1 de l'invertase d'aspergillus niger par expression chez t. Reesei. Il a aussi ete demontre que ce gene peut etre utilise comme marqueur dominant de transformation et qu'il est fonctionnel chez d'autres champignons filamenteux. Ce travail a abouti a la construction de souches recombinantes de t. Reesei produisant une invertase heterologue et par consequent capables d'utiliser le saccharose comme source de carbone. Ceci doit permettre de remplacer le lactose actuellement utilise comme source de carbone pour la production industrielle de cellulases par t. Reesei et d'abaisser le prix de revient de ces enzymes. Ces souches recombinantes ameliorees seront utilisees par l'institut francais du petrole sur le site de la plate-forme experimentale de soustons