Abstract FR:

Le canal sodium présent sur la membrane apicale d'un grand nombre de cellules épithéliales est la cible moléculaire majeure des régulations par l'aldostérone et la vasopressine. Le diurétique amiloride agit en bloquant ce canal. Parmi les différents dérivés de l'amiloride, le phénamil est le plus sélectif et celui qui possède la meilleure affinité pour le canal. Sous forme radio-marquée, le phénamil a permis de titrer le nombre des canaux dans différents tissus comme le rein, la thyroïde et la barrière hémato-encéphalique. Dans ces tissus, les canaux observés lient tous l'amiloride et le phénamil, mais possèdent des caractéristiques variables. Leur observation indique qu'il existe une famille de canaux cationiques sensibles à l'amiloride. Le récepteur du [3H]phénamil a été purifié à homogénéité. Il est formé d'un homodimère de 185 KDA constitué après la formation de ponts disulfurés entre deux sous-unités de 100 KDA. La réincorporation de la fraction purifiée provoque l'apparition d'une activité de transport du sodium, électronique, blocable par le phénamil et par l'amiloride. La purification de la protéine a rendu possible la production d'anticorps polyclonaux et monoclonaux, qui permettent d'identifier la protéine en western blot et en immunoprécipitation. Elle a également conduit au clonage d'un cDNA codant pour le récepteur de l'amiloride humain. Enfin, le gène de la protéine humaine a été localisé sur le chromosome 7, non loin de la région impliquée dans la mucoviscidose qui est une maladie héréditaire qui touche les épithéliums