Abstract FR:

Une analyse compartimentale realisee sur l'etude de l'efflux du k#+(#8#6rb) de racines de chene rouge soumises a une contrainte hydrique, montre des perturbations des flux au niveau du tonoplaste. Deux fractions membranaires sont isolees a des densites de 1,165 et 1,08 par centrifugation sur gradients de densite de saccharose et par un systeme de partage de phase de deux polymeres. Le plasmalemme est identifie dans la fraction la plus dense par le test a l'aptc et par la presence d'une activite mg#2#+-atpase (ph 6,5) sensible au vanadate. Le tonoplaste est caracterise dans la fraction de faible densite par l'existence de l'activite mg#2#+-atpase (ph 8) sensible au nitrate et de l'activite k#+-ppase. L'atp provoque un quenching de fluorescence de la sonde acma pour les deux fractions, qui est annule par la nigericine. Le ppi a le meme effet sur la fraction tonoplaste. Les taux de quenching de 600-700% q. Min##1 mg##1 prot. Pour le plasmalemme et de 1500-2000% q. Min##1 mg##1 prot. Pour le tonoplaste indique un bon couplage entre l'activite hydrolytique et de transport de h#+ de l'atpase. L'ensemble des resultats suggerent un bon isolement et purification de vesicules membranaires d'origine plasmique et tonoplastique