Contrôle de l'expression des gènes codant pour l'albumine et l'alpha-foetoprotéine au cours du développement et dans des cellules d'hépatomes chez le rat
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
In our studies we have tried to elucidate the molecular mechanisms which regulate the albumin and alpha-fetoprotein (AFP) gene expression during rat development and in different transplantable hepatomas and derived cell lines. We first demonstrated that changes in albumin and AFP gene expression are mainly regulated at the transcriptional level. In the course of our analysis, albumin and AFP mRNA molecules were detected in non-hepatic rat tissues suggesting that "hepatocyte-like" cell populations are present in these tissues. Gross rearrangements (amplification-translocation) do not seem to be implicated in the control of expression of both genes. Moreover, restriction site polymorphism of albumin and AFP gene was found in different inbred rat strains. Our studies using DNase I sensitivity analysis demonstrated that major modifications in chromatin structure occur in relation to changes in albumin and AFP gene activity. Alterations in the chromatin structure might be involved in the early establishment of the tissue-specific potential of evert albumin and AFP gene expression. Moreover, DNase I hypersensitive sites were detected upstream the 5’-end of both genes in albumin and/or AFP-producing rat tissues and cell lines. The most striking result was perhaps the finding of different subclasses of hypersensitive sites directly associated with potential or everts gene expression of albumin and AFP genes during hepatic differentiation and neoplasia. Finally, we discussed our future prospects on the search for specific regulatory sequences or proteins which would be involved in the transcriptional regulation of albumin and AFP genes during normal development and neoplasia.
Abstract FR:
Dans cette thèse nous essayons de préciser le type de mécanismes moléculaires : régulant l'expression des gènes d'albumine et d'alpha foetoproteine (AFP) au cours du développement du rat et dans divers hépatomes transplantables ou lignées cellulaires établies en culture. Nous montrons que les changements d'expression de ces deux gènes sont contrôlés principalement au niveau transcriptionnel. Par ailleurs des molécules d'ARNm-ALB et ARNm-AFP ont été détectées dans des tissus d'origine non-hépatique suggérant l'existence de populations de cellules de type « hépatique » dans ces tissus. Des phénomènes de réarrangements géniques globaux (amplification translocation) ne semblent pas intervenir dans le contrôle de l'expression des gènes d’albumine et d'AFP. Par ailleurs, un polymorphisme allélique important existe pour ces deux gènes dans des souches consanguines de rat. Nous montrons principalement que des changements de la conformation chromatinienne sont associés aux variations d'activité de ces gènes. Ainsi ces deux gènes sont sensibles à l'action de la DNase I dans les tissus qui ont la potentialité de les transcrire. De plus, des sites « hypersensibles » à la DNase I ont été détectés en amont des gènes d'albumine et d'AFP. Fait important, la présence de certains sites "hypersensibles » est associée d'une part à l'état de différenciation cellulaire, et d'autre part aux variations de transcription de ces gènes. Finalement, nous présentons des perspectives concernant la recherche des séquences et des protéines « régulatrices » impliquées dans le contrôle transcriptionnel des gènes d'albumine et d'AFP au cours de la différenciation et de la cancérogénèse hépatique.