Études cytologique et génétique de la reproduction sexuée chez la chicorée (Cichorium intybus L. )
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
The development of an ovule and anther clearing technique allowed us to observe and establish the chronology of the different sexual reproduction stages in witloof chicory: micro and megaga metogenesis male cells migration to pollen tube and embryo sac, double fertilization embryogenesis. The 2 sperm cells conection in the pollen tube and also the association between the vegetative nucleus and the 2 sperm cells on entering the embryo sac were demonstrated. This male germ unit appeared to be dissociated in the micropylar area of the embryo sac. The evolvement in the form of sperm cells during migration was observed. The hypothesis of structure regulation by a microtubular network was put forward after investigation of colchicine action on sperm cells. The development of in vitro germination of pollen and zygotic embryos culture allowed us to study in vitro fertilization. Cytological analysis of embryo sacs evidenced the occurrence of in vitro fertilization 3 plants could thus be regenerated. Haploidization was investigated by different ways: in vitro gynogenesis by means of non fertilized ovules culture, in situ gynogenesis using irradiated pollen and in situ androgenesis by ovule irradiation. Cytological observation of the embryo sac allowed us to analyse how these various treatments act and from which cells the gynogenetic embryos derive. The potentialities of each haploidization technique are discussed.
Abstract FR:
Après la mise au point d'une technique d'éclaircissage des ovules et des anthères, nous avons pu observer et établir la chronologie des évènements de la reproduction sexuée chez la chicorée : micro et mégagamétogénèses migration des cellules mâles dans le tube pollinique et dans le sac embryonnaire, double fécondation, embryogenèse. La mise en évidence d'une connexion entre les 2 cellules spermatiques dans le tube pollinique d'une part, et d'une association entre le noyau végétatif et les 2 cellules spermatiques à l'entrée du sac embryonnaire d'autre part, suggère l'existence d'une unité germinale mâle chez la chicorée. Cette unité germinale mâle est dissociée dans la zone micropylaire du sac embryonnaire. L'évolution de la forme des cellules spermatiques pendant le phénomène de migration est observée ; l'hypothèse d'une régulation structurale par un réseau microtubulaire est avancée après étude de l'action de la colchicine sur les cellules spermatiques. La mise au point de la germination du pollen in vitro et de la culture d'embryons zygotiques a permis l'étude de la fécondation in vitro. L'analyse cytologique des sacs embryonnaires a mis en évidence le phénomène de fécondation in vitro et 3 plantes hybrides F1 ont pu être régénérées par cette voie. Ces observations ont révélé une induction de développement gynogénéitique à partir de l'oosphère et de la cellule centrale, provoquée par l'effet pseudogamique des tubes polliniques sur ces cellules. Différentes voies d'haploïdisation ont été explorées gynogénèse in vitro par culture d'ovules non fécondés, gynogenèse in situ par utilisation de pollen irradié et androgenèse in situ par irradiation d’ovules. L'action de ces différents traitements et l'origine des embryons gynogénétiques ont été analysées par observation cytologique du sac embryonnaire.