Abstract FR:

La production de thréonine par fermentation d'une souche Escherichia coli K12 est étudiée. Cinq réactions enzymatiques sont responsables de la biosynthèse de thréonine à partir de l'aspartate chez E. Coli. Quatre des activités enzymatiques intervenant dans cette biosynthèse sont codées par trois gènes, thrA₁A₂, thrB et thrC, regroupés sous forme d'un opéron appelé opéron thréonine. La deuxième réaction enzymatique de cette voie de biosynthèse est catalysée par l'aspartic semialdéhyde deshydrogénase, codée par le gène asd. La souche d'E. Coli AJ11332 porte une mutation dans le gène thrA qui code pour une aspartokinase-I- homosérine deshydrogénase-I insensible à la rétroinhibition par la thréonine. L'opéron thréonine de cette souche présent en multicopie dans la souche AJ11332 entraîne une augmentation de la production de thréonine. Etant donné l'instabilité des vecteurs plasmidiques en absence de pression de sélection, nous avons mis au point un système d'amplification chromosomique stable de gènes en utilisant les propriétés transpositionnelles du bactériophage Mu d'E. Coli. Les phages défectifs Mud sont délétés des fonctions de transposition du phage Mu et sont capables de transposer lorsque ces fonctions sont présentes dans le cytoplasme cellulaire. Des phages défectifs ont été construits, contenant les gènes codant pour les activités enzymatiques intervenant dans la voie de biosynthèse de la thréonine à partir de l'aspartate. Ces phages ont été introduits puis amplifiés dans le chromosome de souches productrices de thréonine. Des souches présentant une augmentation de la production de thréonine ont été ainsi obtenues.