Abstract FR:

La secretogranine ii et la chromogranine a sont des proteines thermosolubles appartenant a la famille de granines, proteines presentes dans les grains de secretion des tissus neuroendocrines et endocrines. Jusqu'alors, la presence de sgii n'avait pas encore ete recherchee chez des especes evolutivement plus agees que les amphibiens. Lorsque nous avons debute ce travail, aucune sequence du precurseur sgii n'etait connue chez les especes non mammaliennes. A l'aide d'outils moleculaires heterologues, nous avons pu montrer la presence d'un homologue de la sgii dans l'hypophyse de truite arc-en-ciel. Cette proteine a ete identifiee sur la base de parentes antigeniques, de similarites de poids moleculaire et de propriete de stabilite a la chaleur. Cette detection de sgii chez les poissons confirme la large distribution de cette famille de proteines au cours de l'evolution. La conservation globale des sequences semble tout de meme relativement faible. En effet, la detection d'un arnm apparente a celui de la sgii humaine n'est possible que lorsque des conditions peu drastiques d'hybridation sont utilisees, conditions qui se sont averees trop limites pour permettre l'isolement d'un adnc sgii chez la truite. La recherche d'un arnm apparente a celui de la cga, chez la truite, a permis la mise en evidence d'un arnm de 2 kb dans le foie. Apres criblage d'une banque de foie de truite, un adnc codant pour une proteine de 445 acides amines, distincte de la cga, a pu etre isole. Les identites de sequence, les analogies de structure et la distribution tissulaire du transcrit indique que cette proteine thxl (trout hemopexin like) constitue l'homologue de l'hemopexine, proteine de fixation de l'heme connue chez les mammiferes. La proteine recombinante thxl a ete exprimee en systeme heterologue baculovirus et purifiee. Des etudes de liaison a l'heme montrent que thxl possede une affinite pour l'heme. La regulation de l'expression du transcrit thxl a ete abordee in vivo et en culture d'hepatocytes en agregats. Nos resultats indiquent principalement que, contrairement a l'hemopexine mammalienne, thxl ne semble pas etre une proteine de la reaction inflammatoire