Abstract FR:

Le baudet du poitou est une population animale dont l'effectif total dans le monde ne depasse pas 180 individus. C'est pour repondre a ce probleme de disparition de l'espece que nous avons entrepris des etudes visant a utiliser en insemination artificielle du sperme cryopreserve de baudet du poitou. Notre etude s'est articulee autour de la maitrise du moment de l'insemination chez la baudette, puis de la mise au point d'une methode de cryopreservation du sperme. L'etude de la croissance folliculaire chez la baudette du poitou montre un effet saisonnier et preconise la premiere insemination artificielle au cours des chaleurs lorsque le follicule atteint une taille de 30 mm au cours du printemps et de 33 mm au cours de l'ete. La congelation des semences a ete realisee en diluant le sperme dans le milieu inra 82 a 60 10#6 spz/ml. Ensuite, le sperme est refroidi de 34c a + 4c selon une pente de -0,5c min#-#1, puis il est conditionne en paillettes de 0,5 ml qui sont congelees dans les vapeurs d'azote pendant 10 minutes puis elles sont alors plongees dans l'azote liquide (-196c). La decongelation du sperme est realisee a 37c pendant 30 secondes. Si la substitution totale ou partielle du glucose par du fructose dans le milieu n'ameliore ni la mobilite, ni les caracteristiques de mouvement des spermatozoides apres decongelation, l'introduction de la l glutamine dans le milieu inra 82m (modifie par 4% du glycerol et 2% du jaune d'uf de caille) ameliore significativement la mobilite et les caracteristiques de mouvement des spermatozoides du baudet du poitou apres decongelation. L'action de cet acide amine s'exerce principalement au cours du processus de la congelation-decongelation. L'utilisation de la glutamine radioactive montre que la penetration de cette molecule n'est pas massive. Ceci suggere que le mecanisme d'action de la glutamine est surtout extracellulaire. Les resultats de fertilite avec le milieu inra 82m de 38 femelles pendant 149 cycles sont negatifs. Les inseminations alternees avec de la semence fraiche pour un cycle et de la semence apres decongelation pour un autre, concernant 13 juments, 6 ponettes et 7 baudettes montrent une hypofertilite nette de baudettes du poitou utilisees et un nombre de gestations insuffisant avec la semence congelee. La substitution du jaune d'uf de poule par le jaune d'uf de caille dans le milieu inra 82 ameliore significativement la mobilite apres decongelation des semences. Par ailleurs, l'augmentation de la quantite de jaune d'uf de caille de 2 a 10% s'avere egalement benefique pour la mobilite apres decongelation. L'analyse biochimique de ces 2 jaunes d'ufs revelent des differences significatives. L'addition dans le milieu inra 82 a la fois de la glutamine a 80 mm et du jaune d'uf de caille a 10% (t294) ameliore nettement la mobilite et les caracteristiques de mouvement des spermatozoides du baudet du poitou apres decongelation. L'etude du statut acrosomique des spermatozoides avant et apres congelation-decongelation, realisee a l'aide d'une lectine, la psa-fitc, montre que celui-ci varie avec le milieu et que le milieu mis au point t2-94 preserve la presence de l'acrosome. L'etude de l'adn nucleaire a l'aide de l'acridine orange montre que la congelation-decongelation n'altere pas ce materiel quelque soit le milieu utilise. Le test hypo-osmotique montre que l'etat des membranes varie significativement avec le milieu de congelation utilise et que le milieu mis au point t294 preserve le mieux l'integrite membranaire. Enfin, la dilution de la semence apres congelation-decongelation dans le milieu t2-94 ameliore la survie in vitro des spermatozoides du baudet du poitou et leur fertilite. En octobre 1995, hermine, henry et hannibal sont les premiers baudets du poitou nes en sperme co