Abstract FR:

La cellulose est le biopolymere le plus abondant sur terre, et l'etude de sa degradation presente une importance ecologique et industrielle croissante. Trois aspects fonctionnels et structuraux des cellulases ont ete abordes au cours de ce travail: l'adsorption, les interactions avec la cellulose cristalline et l'organisation des differents domaines constitutifs des cellulases. Les observations faites en microscopie electronique sur la morphologie de la degradation de fibres de coton, ont permis de mieux cerner le mode d'action d'une endoglucanase, eg v de humicola insolens, sur un substrat cellulosique industriel. Grace a un immunomarquage a l'or colloidal, nous avons pu visualiser les sites de fixation de eg v a la surface des fibres de coton. L'etude de la degradation enzymatique de microcristaux de cellulose de valonia natifs et modifies par trois cellulases de humicola insolens, met en evidence que l'ultrastructure du substrat est le facteur determinant de la reactivite enzymatique. Nos travaux demontrent qu'une diminution du degre de cristallinite et une augmentation de la surface accessible entraine un accroissement important de la reactivite du substrat. Les etudes en diffusion de la lumiere ont fourni des donnees precises sur les coefficients de diffusion de trois cellulases de humicola insolens ainsi qu'une estimation de la taille hydrodynamique de ces enzymes. De plus, cette technique represente un outil interessant pour analyser les differents variants produits lors d'une approche d'ingenierie des proteines. Elle permet, en effet, de suivre le comportement en solution d'un type de proteine en fonction de differents parametres tels que la temperature, le ph et la concentration en proteines