Abstract FR:

Une recherche de bacteriophages actifs sur les bacteries coryneformes a ete entreprise a partir d'echantillons de sol. Quatorze phages actifs sur les corynebacteries ont ete isoles, parmi lesquels se trouvait le phage tempere aau2, infectant arthrobacter aureus. Le phage possede une tete polyedrique et une queue non-contractile. La capside contient deux polypeptides de 27 et 39 kda. Le genome phagique est constitue d'un adn double-brin de 45,4 kb presentant des extremites cohesives. Le genome phagique de aau2 s'integre dans le chromosome de l'hote bacterien par un processus d'integration site-specifique. Les sites d'attachement phagique et bacterien (attp et attb) ainsi que les fonctions necessaires a l'integration du phage dans le chromosome ont ete definis, et leur sequence nucleotidique determinee. Seuls trois nucleotides participent au mecanisme de recombinaison. L'analyse de la sequence nucleotidique de l'integrase potentielle montre la presence d'une proteine basique de 28 kda possedant les quatre acides amines conserves dans la famille des integrases. Trois autres fonctions phagiques impliquees dans l'etablissement de la lysogenie, et dans l'inhibition de la replication intracellulaire du phage, ont ete caracterisees et leur sequence nucleotidique determinee. Un plasmide integratif contenant attp et int a ete developpe. Une integration stable et de forte efficacite du vecteur a ete obtenue dans a. Aureus, mais egalement dans plusieurs especes de corynebacteries industrielles comme corynebacterium glutamicum et brevibacterium lactofermentum. Les sites d'integration dans ces souches sont uniques. Les fonctions integratives de aau2 sont correctement exprimees chez e. Coli, ou il est possible d'obtenir la recombinaison entre deux plasmides compatibles, l'un portant attb, l'autre attp et les fonctions de recombinaison phagiques