Abstract FR:

L'utilisation concomitante de la technique du patch-clamp et de l'imagerie unicellulaire, a permis l'analyse des evenements calciques et electriques se produisant lors de la fecondation dans l'ovocyte de phallusia mammillata. Une diminution rapide du courant calcique membranaire active par depolarisation, une insertion de membrane a la surface de l'ovocyte et une vague de calcium suivie d'oscillations synchrones avec des excursions de potentiel membranaire, ont ainsi ete observes. L'intervention des canaux calciques intracellulaires dans ces evenements a ete exploree. Trois stocks ont ete identifies fonctionnellement dans les ovocytes non fecondes : un stock sensible au cadp-ribose et a la ryanodine, un stock sensible a l'insp#3, un stock sensible au naadp. Leur mise en oeuvre lors de la fecondation conduit a des effets tres specifiques, qui sont le reflet des effets observes lors de la stimulation de ces stocks dans des ovocytes non fecondes : le recepteur de l'insp#3 est responsable des oscillations calciques et de la reprise du cycle meiotique ; le recepteur de la ryanodine, localise sous la membrane plasmique, est responsable de l'insertion de membrane ; le stock sensible au naadp semble intervenir dans la regulation des oscillations calciques. Donc le ca#2#+ relache a une cible differente en fonction du stock calcique mis en jeu. L'enzyme unique responsable de la synthese du cadp-ribose et du naadp dans d'autres especes animales, l'adp-ribosyl cyclase, a ete identifiee fonctionnellement dans cet ovocyte d'ascidie et a un role potentiellement tres important dans la signalisation calcique. L'implication du ryr dans l'insertion de membrane a ete approfondie et deux de ses partenaires, la calmoduline et une fkbp, se sont revelees etre strictement necessaires a cette fonction. Cependant, l'origine de la membrane inseree n'a pas ete authentifiee. L'etude de la relocalisation des stocks calciques au cours du developpement, a mis a jour une dissymetrie au niveau des blastomeres apres la premiere division mitotique. Elle concerne la sensibilite a l'insp#3 et elle est relative a la position des globules polaires. Ce travail montre l'importance, la diversite moleculaire des stocks intracellulaires de ca#2#+ et les tres larges consequences de leur mise en uvre dans les etapes precoces du developpement.