Contribution a l'analyse conformationnelle du ribosome d'e. Coli et a l'etude de son interaction avec l'acide ribonucleique de transfert
Institution:
Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)Disciplines:
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La premiere partie est consacree a l'etude du ribosome dans differents etats. Une analyse systematique des differents parametres qui gouvernent la croissance cristalline a permis d'obtenir des cristaux du ribosome 70s d'e. Coli, sous forme d'aiguilles. L'observation de ces fibrilles au microscope electronique montre des arrangements reguliers permettant l'analyse optique des images. La deuxieme partie se rapporte a l'analyse conformationnelle du rrna de la petite sous-unite par utilisation de sondes chimiques et enzymatiques. La detection des nucleotides accessibles e ces sondes repose sur l'elongation par la reverse transcriptase d'un fragment de dna, complementaire a une region du rna, situee en amont de la region a etudier. Cette methode a permis de tester la conformation des 320 premiers nucleotides du rrna 18s de levure et d'ameliorer le modele de structure secondaire propose. Dans la troisieme partie de ce travail, nous presentons une methode simple permettant la conversion d'une cytosine en 4-thiouracile dans le trna, et l'utilisation de ce trna thiole dans la formation de pontages covalents