Abstract FR:

La comprehension des mecanismes moleculaires de regulation de l'expression des genes codant pour les proteines chez les eucaryotes superieurs passe par la caracterisation des proteines qui interagissent au niveau des sequences regulatrices. Nous avons purifie et caracterise le facteur general de transcription in vitro d'un promoteur minimal (contenant la tata box et l'initiateur). Nous avons montre que btf2 correspond a un complexe multiproteique qui n'interagit pas directement avec le promoteur mais qui s'associe de facon stable avec la rna polymerase ii(b) et les autres facteurs generaux identifies dans notre laboratoire. Ces resultats suggerent que btf2 intregre le complexe de transcription par des interactions proteines/proteines. Nous avons clone et surexprime le cdna correspondant a la sous-unite p62 du complexe btf2. Le polypeptide recombinant, rp62, ne se substitue pas au facteur btf2 dans un test de transcription in vitro. Nous avons cependant pu montrer, a l'aide d'un anticorps monoclonal purifie, que ce polypeptide est soit une composante de l'activite btf2, soit un polypeptide qui lui est fortement associe. Le clonage du cdna a ouvert la voie a une caracterisation complete du facteur btf2. L'obtention des cdna des autres polypeptides du complexe btf2 devrait permettre de progresser vers un systeme de transcription entierement reconstitue