thesis

Etude fonctionnelle des domaines des proteines i/ii des streptocoques oraux

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Jan. 1, 1999

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Les proteines i/ii sont des proteines de surface des streptocoques oraux d'environ 1550 acides amines de poids moleculaire compris entre 180 et 200 kda et presentant plusieurs domaines presentant des caracteristiques structurales specifiques. L'objet de ce travail a ete d'une part, d'etudier la contribution de ces differents domaines dans la fixation des proteines i/ii a divers substrats potentiels d'adhesion des streptocoques oraux lors de la colonisation de l'hote et d'autre part, de tester la capacite de la proteine i/iif de streptococcus mutans omz175 de serotype f a induire la secretion de l'elastase leucocytaire par les cellules monocytaires thp-1. La contribution des differents domaines dans l'activite de fixation des proteines i/ii a ete determinee au moyen de polypeptides recombinants recouvrant ces differents domaines. L'activite de chaque domaine est determinee au moyen du polypeptide restreint a ce domaine ou par comparaison de l'activite des polypeptides excluant et ceux incluant le domaine. Ceci nous a permis de montrer que l'activite de la proteine i/ii est principalement mediee par le domaine alanine dont l'activite est calcium dependante et sucre independante tandis que celle mediee par le domaine variable etendu est calcium independante et sucre dependante ou interviennent principalement le fucose et l'acide n-acetyl neuraminique. Enfin, nous avons montre que la proteine i/ii pouvait induire la secretion de l'elastase leucocytaire par les cellules monocytaires thp1 de facon dose dependante, temps dependante et sucre dependante. Au maximum d'activation, cette proteine induit la liberation d'environ 40% du stock intracellulaire de cette enzyme. Cette etude revele, d'une part la specifite des mecanismes d'activite des differents domaines des proteines i/ii dans leur fixation a leurs ligands et d'autre part, l'implication des streptocoques oraux dans les pathologies ou l'elastase leucocytaire est mise en cause.