Abstract FR:

La chromatographie liquide-liquide centrifuge (cllc), ou chromatographie a contre-courant (ccc), separe les solutes selon leur coefficient de partage entre deux phases liquides. Un champ de forces centrifuges, cree par des mouvements de rotation composes, retient la phase stationnaire liquide dans la colonne, qui consiste en un tube ou une serie de fins canaux. Ce travail a consiste a comprendre le comportement de systemes de solvants varies dans les colonnes des appareils dits de type j et de type cross-axis. Pour le premier type, nous avons propose une correlation entre les caracteristiques des phases du systeme de solvants et son comportement dans la bobine. Une etude de l'influence de la temperature a permis de preciser ces proprietes. L'appareil de type cross-axis etant recent, nous avons d'abord utilise la methodologie des plans d'experiences pour optimiser la retention de la phase stationnaire avec trois systemes de solvants caracteristiques. Les calculs nous ont aussi permis de preciser le role de chaque facteur et de proposer des interpretations explicitant leur influence directe ou indirecte sous forme d'interactions. La deuxieme partie est consacree a la comparaison prealable des appareils de type sanki, de type j et de type cross-axis en terme de retention de la phase stationnaire, d'efficacite et de resolution. La purification d'une proteine recombinante, le facteur de croissance fibroblastique acide (afgf), a ensuite permis de montrer les performances de la cllc lors de l'utilisation de systemes biphasiques aqueux a base de polymeres. La mise au point des compositions de ces systemes ainsi que de l'echantillon injecte a permis l'etude a l'echelle analytique de l'influence de diverses conditions operatoires (debit, vitesse de rotation, temperature) sur la qualite de la purification. La transposition immediate a l'echelle semi-preparative a montre qu'une purification de tres bonne qualite peut etre obtenue en une seule etape