Abstract FR:

Ce travail a ete realise dans la perspective d'applications cliniques dans le domaine de l'immunotherapie des cancers. La premiere partie consiste a developper un protocole d'immunotherapie adoptive par l'optimisation de la transfection de monocytes humains autologues par des vecteurs synthetiques. Dans un premier temps nous avons montre la faisabilite de la transfection des ces cellules par l'utilisation du dogs et d'un gene reporter (betagalactosidase). Compte tenu du caractere phagocytaire de ces cellules, le niveau de transfection observe est faible, difficilement detectable au niveau proteique mais pourrait etre suffisant dans le cadre d'une activation autocrine des cellules. Dans un deuxieme temps, nous avons montre qu'il est possible d'induire une cytotoxicite a l'egard de cellules tumorales en transfectant le gene de l'ifn- a l'aide d'une pei lineaire de 22kda. En presence de gm-csf, la cytotoxicite observee est superieure a celle obtenue par l'activation des cellules par du rhifn-. Cette cytotoxicite ne semble pas etre due a une secretion de tnf-. La deuxieme partie de ce travail a consiste a optimiser les conditions de transfection de fibroblastes primaires humains en utilisant la pei22 associee a un gene reporter. En presence d'un promoteur humain (beta-actine) il est possible d'obtenir un taux de transfection detectable pendant 12 jours. Cette duree est suffisante dans le cadre de protocoles de vaccination antitumorale en utilisant le gene du gm-csf. Les deux modeles presentes seront testes in vivo dans un modele murin scid.