Contribution a l'etude des adn polymerases d'embryon de ble : variation de leur taux d'activite au cours de la germination
Institution:
Bordeaux 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Five factors implicated during DNA replication of wheat embryo were analysed. The factors are DNA polymerases (A, B and C), DNA primase and an auxillary protein called PCNA (Proliferating Cell Nuclear Protein). At first, DNA polymerase A, B and C were purified and characterized respectively by chromatographic steps and physicochemical properties including sensitivity with inhibitors of DNA replication and properties with natural and synthetic templates. The second part deals with variation of activity of the DNA polymerases A, B and C previously purified and characterized during wheat embryo germination. We propose a similarity between wheat embryo DNA polymerases and animal DNA polymerases. DNA polymerase A could be similar to an alpha DNA polymerase. DNA polymerase B could be a DNA polymerase delta like. DNA polymerase C could be a storage protein in seed before germination.
Abstract FR:
Cette thèse est une contribution à l'étude dans les embryons de blé, de trois ADN polymérases (pol A, Pol B et Pol C) d'une activité ADN primase ainsi que d'un facteur protéique associé : le PCNA (Antigène nucléaire de prolifération cellulaire). Ces cinq entités exercent un rôle essentiel lors de la réplication de l'ADN in vivo. La première partie de ce travail concerne la purification et la caractérisation de trois ADN polymérases appelées Pol A, Pol B et Pol C. Cette caractérisation a été faite par l'analyse de leurs propriétés physicochimiques et particulièrement par leur sensibilité vis à vis de certains inhibiteurs de la réplication ainsi que leur comportement vis à vis de certaines matrices naturelles ou synthétiques. La deuxième partie traite de la variation de l'activité de ces trois ADN polymérases purifiées d'embryon de blé au cours de la germination, cette dernière représentant un modèle de réplication in vivo. Cette étude est complétée par le suivi du taux de variation de l'ADN primase et d'une protéine auxiliaire (le PCNA) lors de la germination. L'étude au cours de la germination de ces cinq entités permet de proposer avec moins d'ambiguité que dans la littérature scientifique que : 1- l'ADN polymérase A serait l'équivalent de l'ADN polymérase et animale. 2- l'ADN polymérase B serait l'équivalent de l'ADN polymérase et animale. 3- l'ADN polymérase C assurerait un rôle de protection des ADN polymérases dans la graine mature avant germination.