Analyse moleculaire de la reponse a une carence nutritionnelle chez enterococcus faecalis
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Lors de ce travail, nous avons tout d'abord clone et sequence un gene homologue a ccpa chez enterococcus faecalis, puis verifie son implication dans la repression catabolique chez ce micro-organisme. L'inactivation de ce gene conduit a une diminution du taux de croissance, une derepression de l'operon galketr en presence d'un melange de glucose et de galactose, ainsi qu'a une diminution du taux de transcrit du gene ldh en presence de glucose. Le gene ccpa d'e. Faecalis permet egalement de complementer un mutant ccpa de bacillus subtilis, appuyant le fait que ces deux proteines homologues puissent avoir des fonctions similaires. Nous avons par la suite constate que la mutation de ce gene a un effet pleiotropique sur l'expression genetique de la bacterie. Elle conduit notamment a l'expression de proteines de phase stationnaire lors de la phase exponentielle de croissance. Ceci nous a conduit a separer les proteines de phase stationnaire en deux classes : les cst, dependantes de la repression catabolique, et les pex, non-exprimees en phase exponentielle dans le mutant ccpa. L'induction de quatre cst, appartenant a deux operons, lors de l'entree en phase stationnaire et dans le mutant ccpa a egalement ete verifiee au niveau transcriptionnel. Le role de ces quatre cst lors d'une carence nutritionnelle a alors ete etudie, et la mutation de chacun des deux operons correspondants conduit a une diminution de survie d'e. Faecalis lors d'une carence totale modelisee par une incubation dans l'eau du robinet. En revanche, ces mutations n'influent pas sur le developpement de la multiresistance en phase stationnaire. Ces resultats nous indiquent que le role des cst serait donc plutot d'assurer la survie a long terme des cellules lors d'une carence prolongee, par la mobilisation de sources de carbone alternatives, alors que les pex seraient impliquees dans le developpement de la multiresistance.