Abstract FR:

Un des defis actuels dans le domaine de l'immunoanalyse concerne la mise au point de multi-dosages simultanes de substances presentes dans un fluide biologique. Ceci necessite l'emploi de traceurs differents pour chaque analyte a doser mais qui sont quantifiables simultanement par une technique analytique appropriee. L'immunodosage non-isotopique carbonylmetalloimmunoassay (cmia), developpe recemment, utilise comme traceurs des complexes metal-carbonyles qui sont detectes par ir-tf. Les bandes de vibration co en ir de chaque traceur etant intenses et caracteristiques de l'entite metal-carbonyle, nous avons envisage l'elaboration d'un multi-immunodosage par cmia en serie des substances antiepileptiques. Apres la mise au point du mono-dosage des trois medicaments antiepileptiques (carbamazepine, phenobarbital et phenytoine) par cmia, nous avons etudie les deux conditions majeures necessaires pour l'etablissement d'un multidosage par cmia: la detection simultanee par ir-tf des fractions libres des differents traceurs mis en jeu et realisation simultanee des reactions immunologiques des anticorps specifiques avec leurs antigenes associes. La premiere concerne la determination, a partir du spectre ir d'un melange de traceurs presentant un recouvrement de leurs bandes caracteristiques, de la quantite en chacun des complexes. Grace a des algorithmes matriciels de type moindres carres classiques (cls) ou moindres carres partiels (pls), nous avons detecte quantitativement et simultanement avec moins de 5% d'erreur un melange de trois a cinq entites metal-carbonyles en quantites similaires a celles du dosage par cmia (10-1000 pmol). La seconde consiste en l'etude des interactions parasites possibles entre les reactifs (trois medicaments, trois traceurs et trois anticorps) incubes simultanement: pour les medicaments testes, aucune interaction parasite n'est mise en evidence et les courbes d'etalonnage sont identiques par mono-dosage ou multi-dosage. Ainsi, le multi-dosage par cmia des trois medicaments antiepileptiques a ete effectue avec succes, et les outils matriciels cls et pls s'averent interessants pour l'automatisation d'un tel multi-dosage