Abstract FR:

Les mutations du gène suppresseur de tumeur p53 représentent l'anomalie moléculaire la plus fréquemment observée dans les cancers suggérant que l'inactivation de ce gène constitue une étape clé de la transformation maligne. Le gène p53 code pour un facteur de transcription capable, en réponse à des conditions génotoxiques, de réguler l'expression des gènes p21 et Bax respectivement impliquées dans l'arrêt du cycle cellulaire et l'activation de l'apoptose. Les données à la fois structurales et fonctionnelles suggèrent que la conséquence majeure des mutations du gène p53 dans les cancers est la perte de l'activité transcriptionnelle de p53. Cette thèse a eu pour objet de développer de nouvelles méthodes d'analyse fonctionnelle du gène p53 permettant d'étudier les conséquences biologiques des mutations observées dans les cancers. Ces méthodes, basées sur l'analyse de la fonction transcriptionnelle dans la levure saccharomyces cerevisiae nous ont permis (i) de mettre au point un système d'étude de la mutagénèse du gène p53 in vitro, (ii) de développer des outils diagnostiques pour détecter sélectivement les mutations somatiques et constitutionnelles inactivant la fonction transcriptionnelle de p53, et (iii) d'identifier un transcrit alternatif de p53 non fonctionnel exprimé dans les lymphocytes humains normaux. Enfin, grâce à la mise au point de deux nouveaux systèmes biologiques dans la levure, nous avons pu montrer que l'effet des mutations sur l'activité transcriptionnelle de p53 était hétérogène. En effet si toutes les protéines mutantes analysées sont incapables de transactiver le gène Bax, certaines conservent l'aptitude à transactiver le gène p21. L'ensemble des travaux réalisés indique que l'une des conséquences majeures des mutations de p53 est la perte de l'activité transcriptionnelle, et illustre l'intérêt de la levure saccharomyces cerevisiae pour l'étude fonctionnelle des gènes humains.