Abstract FR:

L'utilisation accrue des methodes d'imagerie microscopique dans le domaine de la cancerologie, et les developpements recents des marqueurs specifiques utilises dans ce contexte ont fait naitre un besoin urgent en ce qui concerne le developpement de procedures de multi-marquages enzymatiques ou fluorescents, et leur quantification cellule a cellule. C'est dans ce contexte de mise au point methodologique qu'ont ete realises les travaux presentes dans cette these. Ils incluent les divers aspects de la standardisation de methodes de multi-marquages, l'adaptation des methodes d'imagerie pour la quantification du marquage in situ du recepteur a l'egf, et la normalisation des mesures. Les techniques developpees pour la quantification par cytometrie en image sont detaillees, faisant apparaitre les limites et les problemes eventuels rencontres, ainsi que la facon de les contourner ou de les resoudre. Ces developpements methodologiques ont ete appliques a l'etude de l'analyse quantitative in situ des recepteurs a l'egf dans les tissus animaux et humains (tumeurs mammaires), en relation avec la cinetique de proliferation de chacune des cellules (marquages ki67, brdu, agnor). L'etude de marquages simultanes des proteines ki67-agnors-egfr associes au marquage de l'adn montre qu'il devrait etre possible de preciser pour chaque cellule en cycle, dans un tissu normal ou tumoral, la relation entre la vitesse du cycle et l'expression des recepteurs a l'egf