Abstract FR:

Le protocole propose pour doser la vitamine b#3 -extraction des differentes formes vitaminiques (nad, nadp, nicotinamide et acide nicotinique) en milieu chlorhydrique, transformation precolonne (en milieu alcalin) de ces formes en acide nicotinique, isolement sur phase stationnaire c18 de ce compose chimique et derivation postcolonne en compose fluorescent par irradiation uv en presence d'eau oxygenee- a presente une repetabilite, un taux de recouvrement et une specificite tres satisfaisantes ainsi qu'une excellente limite de detection (0,02 mg/100g d'aliment). La reaction de derivation postcolonne utilisee pour le dosage de la vitamine b#8 - formation d'un complexe fluorescent entre la vitamine b#8 (d-biotine et d-biocytine) et l'avidine-fitc (isothiocyanate de fluoresceine) apres hydrolyse enzymatique et separation des deux formes actives sur phase stationnaire c18- a ete tres specifique et a permis d'atteindre des teneurs aussi faibles que 0,5g/100g d'aliment, avec une repetabilite et un taux de recouvrement satisfaisants. Pour le dosage de la vitamine b#5, la detection de l'acide d-pantothenique par absorption uv, apres isolement sur phase stationnaire c18 a presente une sensibilite et une specificite insuffisantes. Le dosage des produits d'hydrolyse (acide) de l'acide d-pantothenique -d-pantoyl lactone (par cpg/fid) et -alanine (par clhp/fluorimetrie)- ne s'est pas non plus avere satisfaisant. La proposition originale faite pour resoudre le probleme pose par la multiplicite des formes sous lesquelles se trouve la vitamine b#9 (folates) -transformer, avant separation chromatographique, l'ensemble des folates en 5-ch#3-thf (compose stable possedant un rendement quantique de fluorescence eleve) par un enchainement de reactions simples, rapides et quantitatives (reductions par nabh#4, formylation et acidification)- a ete couronnee de succes et devrait permettre la mise au point prochaine d'une methode de dosage.