thesis

Nucleases artificielles specifiques de sequences d'adn et arn : oligodesoxyribonucleotides couples a la 1, 10-phenanthroline

Defense date:

Jan. 1, 1989

Edit

Institution:

Paris 6

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

Pas de résumé disponible.

Abstract FR:

Le complexe cuivrique de la 1,10-phenanthroline (op) induit en presence d'un agent reducteur et d'oxygene, la coupure de la chaine phosphodiester d'un acide nucleique. Le couplage de cette (op) sur un oligodesoxyribonucleotide a permis d'obtenir des molecules capables de reconnaitre specifiquement une sequence nucleique complementaire de l'oligonucleotide et de degrader specifiquement la cible choisie grace a l'activation chimique de l'(op). Diverses sequences cibles adn et arn en simple brin ont ete utilisees. Une triple helice peut-etre formee entre un oligopyrimidine et une sequence d'adn homopurine-homopyrimidine. Par des techniques d'empreinte, nous avons montre que l'oligonucleotide se fixait dans le grand sillon de l'adn. Un oligopyrimidine dirige contre la sequence de reconnaissance d'une endonuclease de restriction est capable d'inhiber specifiquement l'activite enzymatique de celle-ci grace a la formation d'une triple helise. Nous presentons aussi des resultats obtenus avec des oligopyrimidines couples a l'(op) diriges contre des sequences d'adn lineaire en double brin. Ces oligonucleotides-(op), une fois fixes sur leur substrat complementaire et apres activation chimique, induisent avec une grande efficacite une coupure double brin de leur adn cible. Ces oligonucleotides couples a l'(op) diriges contre des cibles simple brin ou double brin pourront etre utilises dans un avenir proche comme outils de biologie moleculaire (endonucleases artificielles) ou encore comme modulateurs de l'expression genetique in vitro et in vivo agissant sur la traduction ou la transcription d'un gene