Abstract FR:

Cette etude a ete realisee dans le but de determiner l'implication des radicaux libres tels que les radicaux derives de l'oxygene, les radicaux derives de l'ethanol ou le monoxyde d'azote, dans la toxicite cellulaire de l'ethanol. Parmi les mecanismes impliques dans le developpement des atteintes hepatiques liees a l'intoxication alcoolique chronique, le stress oxydatif semble jouer un role essentiel. L'implication de la production de radicaux libres dans l'exacerbation de la lipoperoxydation a ete largement decrite. Nous avons tente de montrer que les lipides n'etaient pas les seules cibles des radicaux libres et que les proteines pouvaient elles-aussi etre oxydees. Notre etude a ete realisee sur des foies de rats alcoolises pendant un mois, de maniere continue, par sonde intragastrique. Une forte alcoolemie, maintenue tout au long de l'experimentation, ainsi qu'un regime riche en acides gras polyinsatures permettent d'observer chez ces rats des atteintes hepatiques severes, proches de celles developpees dans l'alcoolisme humain. Nos resultats montrent que les proteines sont oxydees au cours de l'intoxication alcoolique chronique, telles qu'en temoignent l'augmentation des fonctions carbonyles et la diminution des fonctions thiols dans les proteines, ainsi que l'inactivation d'une enzyme particuliere, la glutamine synthetase. A l'etat physiologique, les proteases alcalines, dont le proteasome 20s, previennent specifiquement l'accumulation des proteines oxydees dans le cytosol. Or, nos resultats montrent qu'au cours de l'alcoolisation, l'activite proteolytique des proteases alcalines et du proteasome 20s sont inhibees. Nous nous sommes interesses a la diminution d'activite du proteasome 20s qui semblerait s'expliquer par une inhibition enzymatique plutot que par une variation de la quantite de proteine, puisqu'une analyse en western-blot ne revele aucune difference dans la quantite de proteasome 20s, entre les rats temoins et les rats alcoolises. Le monoxyde d'azote (no) est un radical implique dans de nombreux processus physiologiques, tels que la vasorelaxation, mais aussi pathologiques, tels que la reponse inflammatoire. Puisque l'inflammation hepatique represente l'une des pathologies observees dans notre modele d'intoxication alcoolique, nous avons mesure l'expression de la no synthase inductible dans le foie. Nos resultats montrent que cette enzyme n'est pas induite dans nos conditions d'alcoolisation. Il semblerait donc que no ne participe pas a la toxicite de l'ethanol. Il pourrait cependant etre suggere que l'absence de production de no par la inos puisse contribuer au developpement des atteintes hepatiques liees a l'intoxication alcoolique chronique. Comme no joue egalement un role important dans le cerveau, notamment dans la neurotransmission, nous avons tente d'etudier l'implication de no dans la neurotoxicite de l'ethanol. Des etudes preliminaires, concernant l'effet de l'intoxication alcoolique sur l'activite de la no synthase et le taux de gmpc in vivo , nous ont conduits a etudier l'effet de l'ethanol sur la nnos par une exposition in vitro. Nos resultats montrent que l'ethanol inactive la nnos, en interagissant avec la l-arginine et la tetrahydrobiopterine, cette inactivation semblant etre mediee, en partie, par le radical hydroxyethyle. En conclusion, l'accumulation de proteines oxydees, liee a l'augmentation de l'oxydation des proteines et a l'inhibition des systemes de degradation, et l'absence d'induction de la inos, dans le foie, pourraient entrainer des perturbations dans le fonctionnement hepatique et contribuer ainsi au developpement des atteintes hepatiques lors d'une intoxication alcoolique chronique, associee a un regime riche en graisses polyinsaturees. De plus, l'inactivation de la nnos neuronale par l'ethanol dans le cervelet, observee in vitro pourrait expliquer la diminution du gmpc, apres intoxication alcoolique, et contribuer a la toxicite de l'ethanol dans le systeme nerveux central.