Abstract FR:

Cette these se compose de deux parties distinctes. Une premiere partie de ce travail concerne, l'etude par mutagenese dirigee, des mecanismes moleculaires impliques dans la cooperativite et l'allosterie de l'aspartate transcarbamylase d'e. Coli. Dans un premier temps nous avons essaye de preciser le role de l'his134 dans la fixation des substrats et dans le mecanisme catalytique par des etudes de ph-dependance d'un mutant dans lequel l'his134 est remplace par une asparagine. L'implication de ce residu dans la fixation du groupement carbonyl du carbamylphosphate a ainsi pu etre etablie. De plus, il semble que ce residu ne soit pas implique dans un mecanisme de catalyse acide-base pour le transfert du carbamyl du carbamylphosphate. Par la suite, apres avoir effectue une serie de mutations portant sur la partie c-terminale de la sous-unite regulatrice, nous avons montre que l'interaction entre la partie c-terminale de la sous-unite regulatrice et la boucle 240 de la sous-unite catalytique est capitale pour le maintien de l'enzyme en etat t. Nous avons egalement mis en evidence le role crucial que joue cette partie de la molecule dans la transmission du signal du ctp. Enfin, nous avons reussi a identifier un residu dans la chaine regulatrice dont le role serait de discriminer le signal activation de celui d'inhibition. En effet, le remplacement de ce residu tyr77 par une phe conduit a une inversion des effets d'activation en inhibition. La deuxieme partie de ce travail concerne l'etude de la proliferation cellulaire observee lors de certains types de pneumoconioses. Nous avons analyse d'une part les effets de particules toxiques sur le metabolisme des ribonucleotides in vitro sur une lignee etablie de macrophages et d'autre part in vivo sur les macrophages alveolaires de rat. Il semblerait que les activites des enzymes impliques dans le metabolisme des pyrimidines ne soient pas affectees. Nous avons entrepri