Abstract FR:

Trois parametres biologiques souvent alteres dans le cancer du sein ont ete etudies par cytometrie d'image sur des cytoponctions de cancer du sein : 1) le contenu d'adn des cellules tumorales qui permet de detecter des remaniements chromosomiques globaux 2) la proliferation cellulaire souvent dereglee dans les cancers, donne une estimation de l'agressivite de la tumeur 3) les remaniements chromosomiques du chromosome 1 qui apparaissent d'une maniere precoce et recurrente dans le cancer du sein. Les capacites d'une analyse in situ par cytometrie d'image par rapport a la cytometrie en flux ont ete evaluees. Le but du travail etait de developper des approches qui ameliorent le diagnostic et le pronostic. L'analyse conjointe de la ploidie et de la proliferation cellulaire a permis de demontrer que l'analyse par cytometrie d'image est reproductible et precise. Les indexes d'adn sont determines avec 5% de variation maximale alors que l'index de marquage des cellules proliferantes est plus variable (25%). La cytometrie d'image permet d'analyser des echantillons contenant un nombre de cellules insuffisant pour une mesure par cytometrie en flux. L'etude de remaniements chromosomiques sur noyaux a ete effectuee par hybridation in situ de sondes fluorescentes. L'approche par comptage des centromeres a revele un certain nombre de difficultes techniques essentiellement liees a l'heterogeneite des signaux. Pour eviter ces problemes, une autre methode basee sur la quantification globale de la fluorescence du noyau hybride a ete developpee. Cette approche a ete validee par la determination du desequilibre existant entre le nombre de bras longs et bras courts du chromosome 1 dans les tumeurs du sein. Cette nouvelle methode a montre la presence d'une selection in vitro lors de la culture cellulaire des tumeurs qui biaise la donnees obtenues par cytogenetique classique.