Abstract FR:

Les travaux de recherche, rapportes dans ce memoire de these, concernent la modulation des mecanismes membranaires de regulation du ph intracellulaire (ph#i), dependants du sodium, dans les myocytes cardiaques normaux et diabetiques. La premiere partie de ce travail a ete consacree a l'analyse de facteurs responsables de la diminution d'activite de l'echangeur na#+/h#+, observee au cours du diabete. Elle a permis de demontrer que, en l'absence de modification du pouvoir tampon intrinseque cellulaire pour les ions h#+, le diabete reduit significativement l'efflux acide via l'echangeur na#+/h#+ ( 42% a un ph#i de 6,9). Nos resultats indiquent que cette diminution d'activite n'est pas due a une sensibilite differente de l'echange na#+/h#+ au ph extracellulaire chez les diabetiques. En revanche, elle est vraisemblablement reliee a la diminution du calcium libre cytosolique (ca#2#+#i) observee dans les myocytes ventriculaires de rats diabetiques. De plus, les resultats obtenus en presence d'un inhibiteur de la proteine kinase dependante de la calcium-calmoduline (pkii), sont en faveur d'une alteration de la modulation de l'echangeur par la pkii chez les diabetiques. A partir de l'ensemble de ces resultats, notre conclusion est la suivante : en raison d'une diminution de la ca#2#+#i, la voie de signalisation impliquant la pkii et controlee par le calcium cytosolique, pourrait etre affectee dans les cellules de diabetiques. Ceci entrainerait une moindre phosphorylation de l'echangeur na#+/h#+ ou de proteines regulatrices de l'echangeur, elles-memes substrats de proteines kinases, et par consequent, une diminution d'activation de l'echangeur. Dans la deuxieme partie de notre travail, nous avons caracterise, dans les myocytes cardiaques de rat adulte, les proprietes physiologiques du mecanisme membranaire alcalinisant dependant du bicarbonate. Il s'agit d'un transporteur mettant en jeu l'ion na#+ mais pas l'ion cl#-, autrement dit, d'un cotransport na#+-hco#3#-. Nos travaux suggerent en outre que la modulation de son activite ne fait intervenir ni le calcium intracellulaire, ni une phosphorylation dependante de la calcium-calmoduline. En revanche, son activite apparait modulee par le metabolisme glycolytique, et l'inhibition de cette voie entraine une diminution d'activite de ce cotransport. La contribution respective de l'echangeur na#+/h#+ et du cotransporteur na#+-hco#3#- a l'extrusion acide est de 67% et 33% a un ph#i de 6,75. Toutefois, dans les myocytes cardiaques de diabetiques, ou l'activite de l'echangeur na#+/h#+ est diminuee et celle du cotransporteur inchangee, la regulation du ph#i apres une acidification intracellulaire peut dependre majoritairement de l'activite du cotransporteur.