thesis

Pneumocystis carinii : caracterisations physicochimiques, immunochimiques, localisation ultrastructurale des antigenes constitutifs et identification des antigenes solubles libres dans la pneumocystose du lapin. relation avec les antigenes de p. carinii isoles chez l'homme et le rat

Defense date:

Jan. 1, 1992

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Institution:

Clermont-Ferrand 2

Disciplines:

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Abstract FR:

Le present travail a porte principalement sur l'analyse de la constitution antigenique de pneumocystis carinii et sur l'interet que presentent les antigenes du parasite pour mettre en evidence l'infestation et permettre de suivre l'evolution de celle-ci au cours des differentes phases evolutives du portage parasitaire. Les etudes ont ete faites a partir de modeles de pneumocystose chez le lapin. Les proprietes physicochimiques et antigeniques des constituants de p. Carinii ont ete precisees grace a la combinaison des techniques de chromatographie sous haute pression, d'immunoempreinte, d'immunotransfert et d'immunoaffinite. Onze principaux complexes antigeniques de masses moleculaires 60 a 310 kda, dont les sous-unites polypeptidiques s'echelonnent de 27 a 170 kda, ont ete identifies. Les polypeptides de 39 kda (gp39), 45 kda (gp45), 55 kda (gp55), 65 kda (gp65) et 116 kda (gp116) portent des residus glucidiques mis en evidence grace a l'association de diverses reactions sollicitant l'activite de la concanavaline a, du bleu alcian et du periodate schiff. Une approche de la localisation cellulaire realisee par immunomarquage a l'or colloidal, indique que les epitopes portes par la gp39 se localisent principalement a l'interieur des formes kystiques tandis que ceux portes par la gp55 s'expriment a la surface et a l'interieur des kystes et trophozoites et ceux portes par la gp116 se trouvent surtout a la surface de ces organismes. La gp39 et la gp55 sont deux des constituants qui ont ete reconnus avec la plus grande frequence (plus de 65%) par les anticorps produits par les lapins au cours des trois phases evolutives du portage parasitaire. Les anticorps diriges contre ces deux constituants pourraient donc constituer des marqueurs de l'infestation. Dans les echantillons de lavage pulmonaire et de serum, un constituant de 80 kda a ete frequemment detecte dans durant les trois phases evolutives du portage parasitaire. D'autres constituants de 27 kda, 39 kda, 45 kda, 55 kda, 70 kda et 116 kda ont egalement ete identifies notamment, dans les echantillons de lavage pulmonaire de lapins massivement parasites. Parmi ces constituants, celui de 39 kda a ete le plus constant: principalement mis en evidence dans 19,27% des echantillons de serum et 66,66% des echantillons de lavage pulmonaire de lapins massivement infestes, il semble etre un candidat pour caracteriser l'infestation aigue. Enfin une premiere approche des differences et ressemblances entre constituants de p. Carinii isole chez l'homme, le lapin et le rat a ete effectuee