Abstract FR:

L'oncogene ha-ras fait partie d'une famille de trois genes, ha-, ki- et n-ras, qui sont impliques dans environ 30% des cancers humains. L'activation de ces oncogenes par des mutations ponctuelles dans la sequence codante est bien caracterisee depuis environ une dizaine d'annees. Cette activation est frequemment associee a une surexpression du gene mute ou meme du gene normal. Peu de choses sont connues sur la regulation de l'expression de ces genes et l'implication potentielle de celle-ci dans certains cancers. Nous avons effectue une analyse structurale de la region 5 du gene ha-ras de souris afin de caracteriser les elements de regulation de la transcription, d'une part au niveau du promoteur et d'autre part au niveau du premier intron ou intron 0 qui presente une region d'homologie conservee a 76% entre la souris et l'homme. Nous avons pu montrer que les facteurs nucleaires interagissant au niveau du promoteur sont essentiellement des facteurs de transcription sp1 ou de la famille sp1. Afin de caracteriser le role de l'intron 0 du gene ha-ras de souris dans la regulation transcriptionnelle, nous avons effectue des etudes fonctionnelles et d'interaction adn-proteine au niveau de cet intron. Ainsi, nous avons pu mettre en evidence onze sequences interagissant avec des facteurs nucleaires. Nous avons pu egalement mettre en evidence une certaine complexite dans la regulation avec l'existence de plusieurs types d'elements influencant de facon positive ou negative le taux de transcription du gene ha-ras. En effet, les analyses par mutagenese dirigee de certains de ces sites ont permis de montrer qu'une sequence, interagissant avec deux complexes proteiques nucleaires, est necessaire pour une activite de type Enhancer au niveau de l'intron 0. De plus, nous avons pu montrer que deux autres sequences, en aval de la premiere, ont respectivement une action negative et positive sur l'activite du promoteur. L'element negatif fixe un complexe proteique nucleaire qui interagit aussi avec element positif. Cependant, ce dernier fixe egalement deux autres complexes apparentes au facteur de transcription sp1 ou de la famille sp1. De plus, il existe plus en aval dans l'intron, d'autres elements ayant une action de type silencer qui modulent l'activite de l'element de type enhancer.