Effet de ligands de PPAR sur l'expression de deux marqueurs potentiels de progression des cancers de la vessie
Institution:
BesançonDisciplines:
Directors:
Abstract EN:
Urothelial carcinoma is the most common solid malignancy ot the b\adder. Tumors can be classified into three categories: (i) tumors confined to the urothelium (pTa) which will recur at least once and progress to infiltrating or less differentiated neoplasms; (ii) muscle-invasive carcinomas (>pT2) and (iii) tumors confined to the lamina propria (pTl) that will progress to a poor prognosis muscle-invasive disease and are potentially lethal. The clinical outcome of stroma-invasive (pTl) bladder tumors is unpredictable, that is why novel prognostic factors, that would give information independently of classical predictors, are necessary to improve the biological assessment of the PTI tumors. Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF or VEGF-A) is considered as one of the most important angiogenic regulator in tumor angiogenesis. Northern-blotting analysis and quantitative RT-PCR revealed that VEGF transcript levels were higher in PTI and pT2 bladder cancers than in pTa tumors, which suggested that VEGF mRNA level could serve as a prognostic indicator of progression in bladder cancer. In a previous study, we reported that in two different human bladder cancer cell lines, RT4 (derived from grade I papillary carcinoma) and T24 (derived from grade Ill undifferentiated carcinoma), VEGF was differentially up-regulated by the three PPAR isotypes. Its expression was increased by PPARa, p, and in RT4 cells and only by PPARß in T24 cells. We hypothesized that the loss of nuclear localization of a protein related to the FABP family in grade Ill undifferentiated carcinomaderived T24 cells could explain this difference because some isotypes of FABP could regulate the PPAR transcriptional activity through transport of P PAR agonists from cytoplasm to nucleus. We demonstrated that A-FABP is present in the cytoplasm and in the nucleus of RT4 cells and strictly in the cytoplasm ofT24 cells. We reported, from clinical samples of bladder tumors, that the decrease of A-FABP transcript level is significantly linked to tumor stage and to histologic grade. A loss of A-FABP expression is observed in poor prognosis high grade PTI tumors in comparaison to good prognosis tumors suggesting that A-FABP is a tumor suppressor gene. Thus, the re-expression of AFABP could be a putative therapeutic approach in early stage bladder cancer to prevent disease progression. We demonstrated that this marker is up-regulated by pharmacological molecules such as fibrates and thiazolidinediones (PPARa and y agonist). According to these results, these molecules could be used for bladder cancer treatment
Abstract FR:
Les tumeurs urothéliales sont divisées en trois groupes : les tumeurs superficielles de stade pTa qui récidivent souvent mais qui progressent très peu, les tumeurs invasives (stade PT2 à pT4) et les tumeurs superficielles à risque qui progressent souvent vers un phénotype agressif. L'identification de nouveaux marqueurs moléculaires paraît donc essentielle pour prévoir l'évolution tumorale des tumeurs superficielles afin d'adapter le traitement. Le VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) est un facteur clé de l'angiogenèse. L'étude, par northern-blotting et par RT-PCR quantitative, de l'expression des différents transcrits du vegf, à partir d'échantillons tumoraux de vessie, a montré que les carcinomes invasifs expriment plus de VEGF que les tumeurs urothéliales superficielles, suggérant que le VEGF serait un marqueur de progression des tumeurs urothéliales. Dans un modèle cellulaire développé au laboratoire, il a été montré que les trois isotypes des PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptors) sont impliqués dans la régulation différentielle de l'expression du VEGF selon le degré de différenciation des cellules tumorales de vessie. En effet, les ligands de PPARa, et augmentent l'expression du VEGF dans les cellules RT4, dérivée d'une tumeur papillaire bien différenciée de grade I, alors que seul le ligand de PPARß augmente son expression dans les cellules T24, dérivée d'une tumeur indifférenciée de grade III. L'absence d'effet des PPARa et sur l'expression du VEGF dans les cellules T24 pourrait être due à l'absence de localisation nucléaire d'une protéine de la famille des FABP (Fatty Acid Binding Protein). Nous avons supposé que certaines de ces protéines étaient capables de réguler l'activité transcriptionnelle des PPAR, grâce à la prise en charge des ligands du cytoplasme vers le noyau. Nous avons montré que la A-FABP (Adipocyte-FABP) était présente à la fois dans le noyau et dans le cytosol des cellules RT4 et uniquement dans le cytosol des cellules T24. La A-FABP serait un marqueur potentiel de progression des carcinomes urothéliaux. C'est pourquoi, nous avons développé une stratégie de quantification de la A-FABP ciblant l'ARNm et nous avons montré, à partir d'échantillons tumoraux de vessie, que le taux de A-FABP chutait en fonction du stade tumoral. Ces résultats suggérent que le gène a-fabp est un gène suppresseur de tumeur. Nous avons donc émis l'hypothèse selon laquelle il serait possible en contrôlant son expression, de bloquer la progression tumorale des cancers de la vessie. Ainsi, des molécules pharmacologiques, comme les fibrates et les thiazolidinediones (ligands des PPARa et y), pourraient être envisagées dans le traitement des cancers de la vessie puisque nous avons montré que dans les cellules T24, elles augmentent l'expression de la A-FABP.