thesis

Expression des gènes de mucines humaines : étude de la stabilité, de l'hétérogénéité et du polymorphisme des ARNm

Defense date:

Jan. 1, 1997

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Institution:

Lille 1

Disciplines:

Directors:

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Abstract FR:

Les mucines confèrent au mucus ses propriétés physicochimiques et biologiques. Huit gènes de mucines ont été caractérisés possédant tous dans leurs séquences codantes un domaine compose de sous-unités répétées en tandem. L'organisation de deux de ces gènes, muc 1 et muc 7, a été publiée et codent chacun pour une petite mucine. Les autres gènes muc 2, muc 3, muc 4, muc 5ac, muc 5b et muc 6 révèlent en northern blot, un continuum homogène de transcrits s'étendant de 1 à 20 kb environ et dont la signification biologique était inconnue à ce jour. Différentes hypothèses ont été débattues dans la littérature autour de mécanismes biologiques (diversité, instabilité) ou Arte factuels (dégradation, séquence inusuelle répétitive). Au cours de ce travail, nous avons explore ces deux hypothèses afin d'élucider cette caractéristique propre à ces gènes de mucines. L'étude des fractions nucléaires, polynomiales et cytoplasmiques des arnm exprimes par la muqueuse colique puis l'étude de leur demi-vie dans le modelé cellulaire colique ht 29-mtx nous ont permis de démontrer la grande stabilité des arnm de ces gènes de mucines. Ensuite, l'étude de différents protocoles de purification des arn et de séparation electrophoretique (conventionnelle ou en champs pulses) nous ont permis de démontrer la taille inusuelle de ces arnm comprise entre 14 et 22 kb. Chaque gène, dans les tissus étudies, code un seul transcrit présentant un polymorphisme de type v. N. T. R. (variable number of tandem repeats) variable (excepte muc 5b) dont l'étude a pu être abordée