Caractérisation moléculaire d'un antigène des granules denses de Toxoplasma gondii (gra5) et d'une protéine apparentée
Institution:
Lille 1Disciplines:
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Au cours de ce travail, nous avons entrepris la caractérisation moléculaire de la protéine p21 ou gra5 de toxoplasma gondii. L'antigène p21 est commun aux stades tachyzoite (stade invasif durant lequel le parasite se divise dans une vacuole parasitophore) et bradyzoite (caractérisé par l'enkystement des parasites). C'est une molécule des granules denses du toxoplasme qui est détectée, après l'invasion de la cellule-hôte, à la membrane de la vacuole parasitophore ou à la paroi des kystes. Afin de cloner le gène gra5, une banque d'expression d'adnc de tachyzoites a été criblée à l'aide d'un sérum de rat dirigé contre une fraction hplc enrichie en antigène p21. Ce criblage a conduit à isoler des inserts codant pour différentes protéines, en particulier gra5 et une protéine de 32kda. Ces deux molécules ont été exprimées sous forme recombinante fusionnée. L'analyse des sérums anti-protéines recombinantes a permis de montrer l'existence d'une réactivité antigénique croisée entre ces deux molécules. Le séquençage complet du gène gra5 et de son environnement génomique a été réalisé à partir des inserts génomique et d'adnc isolés par hybridation.