thesis

Le système plasmine-plasminogène dans la protéolyse du lait : Mise au point d'un dosage différentiel des deux composants à l'aide de sondes antigèniques monoclonales

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Besançon

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Les antigènes, plasmine et plasminogène bovins, ont été purifiés en utilisant le plasma comme source riche en antigène. Des anticorps polyclonaux de lapin reconnaissant la plasmine et le plasminogène ont été produits, ainsi qu'une importante collection d'anticorps monoclonaux murins double-reconnaisseurs d'une part et spécifiques du plasminogène d'autre part. Ces anticorps ont été caractérisés par différentes méthodes immunochimiques (ACP-ELISA, DAS-ELISA, immunoblotting et système BIA-core). L'obtention de ces trois types d'anticorps a permis la mise au point de deux tests ELISA sandwich rapides et sensibles, permettant la quantification du plasminogène seul pour l'un et de l'ensemble plasmine+plasminogène pour l'autre. L'application et la conjugaison de ces deux méthodes de dosage permet la détermination de la concentration en plasminogène (détermination directe) et en plasmine (détermination par défaut) d'un lait sans avoir à soumettre l'échantillon en question à un traitement autre qu'un simple écrémage. La dernière partie de ce travail a été consacrée à l'étude de l'évolution des concentrations en plasmine et plasminogène du lait en fonction du stade de lactation de vaches non taries. Le grand nombre d'échantillons analysés (223) a permis de mettre en évidence une nette augmentation des teneurs en plasmine et plasminogène au moment du vêlage correspondant à un afflux massif de sang dans le lait