Abstract FR:

Le rôle principal des mélanocytes est de synthétiser de la mélanine dans les mélanosomes puis de les transférer aux kératinocytes pour les protéger des effets mutagènes des ultraviolets. De nombreux gènes sont impliqués dans ce processus dont RAB27A et CTNS mutés respectivement dans le syndrome de Griscelli-Prunieras type 2 (SG2) et la cystinose infantile. RAB27A, une GTPase recrute à la surface des mélanosomes, via la mélanophiline, le moteur moléculaire MyosineVa ce qui permet leur transport distal le long du réseau d’actine. Au cours de ce travail j’ai caractérisé les défauts moléculaires de 3 patients atteints de SG2 ayant une mutation faux sens homozygote de RAB27A aboutissant à une transition W73G, L130P et A152P. J’ai ensuite montré que le transport actine-dépendant des mélanosomes est stimulé par l’α-MSH via l’AMPc. Cette stimulation passe à court terme par les protéines p21Rho et ROCK et par une augmentation de l’interaction de la mélanophiline avec l’actine et à long terme par la stimulation de Rab27a. Enfin j’ai montré que le transport actine-dépendant des mélanosomes est régulé par MITF via essentiellement la régulation de RAB27A. Cette régulation est directe et constitue le principal mode de régulation du transport de mélanosomes. La cystinosine est un co-transporteur lysosomal de cystine/H+ dont le rôle dans les mélanocytes est inconnu. J’ai montré que la cystinosine est une protéine lysosomale et que son inhibition bloque la pigmentation induite par l’AMPc suite à une augmentation de la dégradation de la tyrosinase et une acidification du mélanosome. Par ailleurs l’expression de Ctns est régulée par l’AMPc, probablement par le biais de MITF.