Abstract FR:

La "calcium- and integrin-binding protein" (CIB) est une protéine cytoplasmique fixatrice de calcium, interagissant spécifiquement avec le domaine cytoplasmique de la sous-unité alpha de l'intégrine [alpha]IIb[bêta]3 (intégrine spécifique des plaquettes sanguines). Dans le but d'apporter des informations structurales concernant cette interaction et de façon à contribuer à élucider le rôle de CIB vis-à-vis du récepteur plaquettaire [alpha]IIb[bêta]3, nous avons étudié l'interaction in vitro entre un peptide correspondant à la partie cytoplasmique de la sous-unité [alpha]IIb : le peptide [alpha]IIb(Kexp. 989-Eexp. 1008) et le domaine C-terminal de CIB, celui là même capable de fixer le calcium. La RMN a été notre technique de choix pour étudier cette interaction au niveau moléculaire. L'obtention de l'un et l'autre des partenaires pur et enrichi en isotopes stables 15N et 13C s'est effectuée grâce à l'utilisation du domaine B1 de la protéine G de streptocoque en tant que protéine de fusion. Cette étape nous a permis dans un premier temps de définir les conditions d'expression, de purification et de solubilisation adéquates pour l'obtention de spectres RMN de qualité et exploitables pour chacune des molécules seules en solution, et d'en étudier les caractéristiques structurales et biochimiques. Dans un second temps, nous avons étudié l'une et l'autre des molécules dans leur interaction avec leur partenaire moléculaire. Nous avons tout d'abord constaté que l'interaction est caractérisée par une faible affinité.