Bestrophine-1 : identification moléculaire : rôle et régulation dans les ganglions rachidiens dorsaux après traumatisme du système nerveux périphérique
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Sensory neurons shift from a transmitting mode to a regenerative state following peripheral nerve injury. This modification is necessary to the peripheral sensitivity recovery. Massive phenotypic changes support this process. Previous study demonstrated that neurons from dorsal root ganglia show important changes in their chloride homeostasis. Indeed, they express calcium-activated chloride currents (CaCC) and they present a two fold increase in their intracellular chloride concentration. We demonstrate that peripheral nerve injury leads to the sur-expression of the Best1 gene, and its protein supports functional expression of CaCC by electrophysiological recordings and quantitative gene expression strategies. Moreover, studying regulation mechanisms highlight the involvement of the extracellular matrix in the secretion of the cytokine interleukin-6, which in turn promotes the expression of Best1. Chloride ions are part of the CaCC regulatory machinery, but the mechanism is still elusive. In the third part, we demonstrate that Bestrophin-1 inhibition by RNA interference and genetic invalidation decreases the neurite outgrowth velocity in vivo and slow down the peripheral sensibility recovery. The Bestrophin-1 involvement in regenerative process might be due to its membrane stretch sensibility
Abstract FR:
La lésion nerveuse périphérique provoque dans les neurones sensoriels le passage d'un état de transmission à un état de régénération dans l'optique de recouvrer la sensibilité périphérique. Des modifications phénotypiques importantes supportent ce processus. Des études précédentes ont montré que les neurones de ganglions rachidiens dorsaux présentent des modifications importantes de l'homéostasie chlorure. En effet, ils expriment un courant chlorure activé par le calcium (CaCC) et leur concentration intracellulaire en ions chlorures est augmentée. Les travaux effectués au cours de ma thèse de doctorat montrent que le traumatisme périphérique induit la surexpression du gène Best1, dont la protéine Bestrophin-1, sous tend l'expression de CaCC dans les neurones sensoriels, par des méthodes d'enregistrements électrophysiologiques et d'expression génique. De plus, l'étude des mécanismes de régulation de CaCC permettent de mettre en lumière une implication de la matrice extracellulaire dans la sécrétion de la cytokine interleukin-6, qui en retour favorise la surexpression du gène Best1. Les ions chlorures participent également à l'activation de CaCC, sans pour autant que le mécanisme ne soit pour l'heure défini. Dans un troisième temps, l'inhibition par ARN interférence et l'invalidation génétique de la Bestrophin-1 conduit à une diminution de la vitesse de pousse in vitro des neurites ainsi qu'à un ralentissement du recouvrement de la sensibilité périphérique. Cette implication de la Bestrophin-1 dans les mécanismes de régénération peut être due à la sensibilité du canal à un étirement membranaire