Abstract FR:

Dans le système nerveux central, les neurones cholinergiques sont impliqués dans des fonctions diverses telles que l'apprentissage, la mémoire ou le sommeil. Leur rôle physiologique a été déterminé principalement par des lésions, qui ne sont pas toutes spécifiques et détruisent les neurones. Afin de contourner cette limite, mon travail de thèse a eu pour objectif de développer une approche permettant d’inactiver de manière spécifique, et sans les détruire, les neurones des différents noyaux cholinergiques du cerveau. La stratégie consiste à inhiber l’expression de la choline acétyltransférase (ChAT), enzyme de biosynthèse de l’acétylcholine, sélectivement dans les neurones d’intérêt par la méthode d’interférence par l’ARN et à analyser les conséquences fonctionnelles de leur inactivation. La première étape a consisté à identifier un shARN, conservé chez le rat et la souris, capable d'inhiber très efficacement (>90%) l’expression de la ChAT in vitro. Afin d’obtenir une expression stable du shARN, un vecteur lentiviral a été construit et produit. Son efficacité a été validée sur des cellules cholinergiques en culture. Ce vecteur lentiviral a été administré dans le septum médian (SM) de rat afin d’inactiver les afférences cholinergiques de l’hippocampe. Les conditions expérimentales ont été optimisées et l’administration de ce vecteur entraîne jusqu’à 87% d’inhibition de l’expression de la ChAT. Les conséquences de l’inactivation des neurones cholinergiques de la voie septo-hippocampique sur les performances cognitives ont été analysées. Les résultats préliminaires suggèrent un effet de l’inhibition de la ChAT dans le SM sur la mémoire spatiale à long terme.