Abstract FR:

L'apamine est un peptide neurotoxique du venin d'abeille bloquant specifiquement un canal potassium calcium-dependant. La purification du peptide naturel, a partir du venin, nous a procure l'outil de depart du travail. L'etude des relations structure-activite a ete realisee a l'aide de peptides synthetiques et d'apamine naturelle modifiee chimiquement. Deux methodes de synthese ont ete utilisees, soit la synthese recurente classique, les acides amines etant greffes les uns a la suite des autres de l'extremite c-terminale a l'extremite n-terminale sur un polymere; soit par couplage de fragments, en preparant le fragment 1-12, proteges sur les chaines laterales des acides amines trifonctionnels, qui, apres purification, est couple a la sequence c-terminale desiree, prealablement assemblee sur un polymere. Les resultats des tests biologiques obtenus pour les differents analogues nous ont permis de definir le site actif de l'apamine. Celui-ci est centre essentiellement autour de trois residus, arginine-13 et 14 et glutamine-17. La modification de chacun de ces residus entraine une tres forte baisse d'activite (facteur 4 en general) mais chaque analogue se presente comme un agoniste, toxique envers la souris avec une symptomatologie identique a la molecule naturelle et avec une affinite specifique d'environ 10##7 m pour le recepteur. Par modifications chimiques et caracterisation tres poussee des derives synthetises, nous avons obtenu des marqueurs specifiques de tres haute affinite du recepteur de l'apamine. Ainsi, des derives radiomarques selectivement azides sur l'une ou l'autre des deux amines libres du peptide nous ont permis de detecter quatre proteines pouvant constituer le canal potassium sensible a l'apamine, deux etant accessibles depuis l'azide fixe a la cysteine-1 et deux depuis l'azide fixe a la lysine-4